紫外可見分光光度計(jì)是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜，來研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。
紫外可見分光光度計(jì)四個(gè)方面的條件設(shè)定：
(1)狹縫寬度
狹縫寬度過大，入射光的單色性差；狹縫寬度太小，入射光的強(qiáng)減弱。狹縫寬度過大或過小均會(huì)造成靈敏度降低，較佳選擇是產(chǎn)生較小誤差情況下的較大狹縫。一般選用儀器的狹縫寬琶度應(yīng)小于待測樣品吸收帶的半寬度，否則測得的吸光度值會(huì)偏低，狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸光度不再；加為準(zhǔn)，對于大部分被測品種，可以使用2nm縫寬。
(2)測量波長
在定量分析中，為了提高測定的靈敏度，入射光的波長應(yīng)選擇被測物的較大吸收波長λmax，如果λmax有干擾，可選擇另一條靈敏度稍低、但能避免干擾的譜線，所以，適當(dāng)選擇入射光的波長，不僅能提高測定的靈敏度，還能提高測定的準(zhǔn)確度。
(3)空白溶液的選擇
空白溶液是用來調(diào)節(jié)吸光度測量工作零點(diǎn)即A=0，T=的溶液，以消除溶液中其它基體組分以及吸收池和溶劑對入射光的反射和吸收所帶來的誤差。根據(jù)情況不同，常用空白溶液有如下幾種選擇。
?、偃軇┛瞻桩?dāng)溶液中只有待測組分在測定波長下有吸收，而其它組分無吸收時(shí)，可用純?nèi)軇┳骺瞻住?/div>
?、谠噭┛瞻兹绻@色劑或其它試劑有吸收，而待測試樣溶液無吸收，則用不加待測組分的其它試劑作空白。
③試樣空白如果試樣基體有吸收，而顯色劑或其它試劑無吸收，則用不加顯色劑的試樣溶液作空白。
(4)控制適當(dāng)?shù)奈舛确秶?/div>
可通過控制被測物濃度或改變吸收池厚度來實(shí)現(xiàn)吸光度合理的范圍，以盡量減小測量誤差。一般吸光度盡量控制在0.1-0.8范圍。
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